Olaquindox ELISA鶏のポーク アヒル96 Wellsのための診断方法テスト/キットの感受性0.2 Ppb

鶏のポーク アヒル96 WellsのためのOlaquindox ELISAテスト キット/キットの感受性0.2のppb

1. 主義

このテスト キットはサンプルの検出のofOlaquindoxのための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。連結の抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。サンプルのTheOlaquindoxおよびマイクロよ縞でプリコートされる連結の抗原は反Olaquindox抗体のために競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にそれでOlaquindoxの否定的な相関関係がある。この価値は標準的なカーブと比較され、Olaquindoxの集中は続いて得られる。

2. 技術仕様

感受性:0.2のppb
定温器の温度:37℃
定温器の時間:30min~30min~15min

検出限界:
ポーク、鶏0.2のppb
ブタのレバー1 ppb
供給20ppb

交さ反応率:
Olaquindox100%
Carbadox<7>

回復率:
Tissue95%±25%
Feed70%±20%

3. 部品

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:microplateの読者（450nm/630nm）、ホモジェナイザー、発振器、測定する遠心分離機は、窒素乾燥装置およびバランス（0.01 g）の定温器の相互感覚ピペットで移す。
2） Micropipettors:200µLへの単一チャネルの20および1000µLおよび多重チャンネル30~300µlへの100;
3）試薬:アセトニトリル、N-hexane、Al2O3

5. サンプル前処理

指示
次のポイントはの前処理の前にを種類のサンプル取扱われなければならない:
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具はきれいであるために点検されなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル準備
1） Sampleredissolvingの解決:Dilute2×は1:1に脱イオンされた水が付いている解決の再溶解を集中した

5.1Tissues （鶏、ポーク/レバー）
1. 50ml遠心分離機管に均質にされたサンプルの2± 0.05g、add10mLAcetonitrileを（水なしで）、きちんと揺するfor2minを運びなさい。10minのための室温（20 - 25℃）のabove4000r/分の遠心分離機。
2.窒素とまたは56℃で空気乾燥するべきTake5mLの上澄み、打撃。
3.室温（20-25℃）でabove4000r/分に乾燥したresiduesinの2mlNヘキサン、30sのための薄くされた再溶解の解決のadd1mLを、mixthoroughly、遠心分離機for5min分解しなさい。layerNヘキサン段階を取除きなさい。
4. 50に分析のためのµLを取りなさい。
サンプルの希薄の折目:1

5.2Feed
1. 1± 0.05 gの均質にした遠心分離機管にサンプルを、加える2gAl2O3、そして5mlAcetonitrile、shakeviolently for3minの25℃ for5minのabove4000r/分の遠心分離機を重量を量りなさい;
2. Take50ulsupernatantの950ulの組合せはsolutionevenly再溶解を、取る分析のための50µL層の液体を薄くした。
サンプルの希薄の折目:100

6. ELISAのプロシージャ

6.1指示
1）は室温（20-25℃）に使用の前にすべての試薬およびマイクロよストリップを持って来る;
2）使用の直後の2-8℃へのリターンすべての試薬;
3） ELISAの分析の再現性は、大部分は、版の洗浄の一貫性によって決まる。版の洗浄の正しい操作はELISAのプロシージャの急所である;
4）一定した温度の孵化のために、すべてのサンプルおよび試薬は露光量を避けなければなり各microplateはカバー膜によって密封されるべきである。

6.2操作手順
1）はすべての必須の試薬を取り、少なくとも30minのための室温（20-25℃）で保つ。各試薬が使用混合されたよりかなり前に揺れなければならないことに注目すれば;
2）は望ましいmicrowellのストリップおよび版フレームを取る。未使用のmicroplatesは2-8°Cで封じ直され、貯えられるべきである;
3）解決の準備:20×の希薄な40のmLは1:19 （20×によって集中される洗浄緩衝の1部+脱イオンされた水の19部）に脱イオンされた水が付いている洗浄の緩衝を集中したり、または必要として準備する;
4）番号付け:サンプルおよび標準ソリューションに従ってmicrowellsに番号を付けなさい;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りにされるべきである;位置を記録しなさい;
5）はサンプルまたは標準ソリューションの50井戸を分けるためにµLを加え次に各井戸に抗体の使用液の50 µLを加える。よく混合するために穏やかに揺すりカバー フィルムでmicroplateをカバーし、そして30分の37°Cで孵化させなさい;
6）洗浄microplate洗浄の緩衝の250 µL/wellの4-5回;井戸を15-30秒の洗浄の緩衝で浸し、吸収性のペーパーとの乾燥した（どの気泡でもきれいなピペットの先端と断ち切られる叩くことの後にあったら）軽く打ちなさい）;
7）は各井戸に酵素の共役の100 µLを、振動および組合せ、カバー カバー フィルムが付いているmicroplate穏やかに加え、30分の37°Cで孵化する;井戸からの液体を注ぎ、洗浄緩衝が付いているmicroplateを洗浄し、そして6）歩み続けなさい。
8）色の開発:各井戸にBの解決の基質Aの解決の50 µLをおよび50 µL加えなさい。穏やかに組合せ揺すり、色の開発のための暗闇の15分の37°Cで孵化させなさい;
9）試金:各井戸に停止解決の50 µLを加えなさい。混合するために穏やかに揺すりなさい。ODの価値を定めるために450nmにmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分以内の二波長450/630nmでODの価値を読むことを推薦する）。

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値に満足なofOlaquindoxとの否定的な相関関係があることノート。

7.1質的な決定
集中範囲（ng/mL）は比較から標準ソリューションのそれのサンプルの平均ODの価値得ることができる。標準ソリューションのそれらは支持者としてⅠあるが、サンプルのODの価値が0.3であると仮定すること、およびサンプルⅡの仮定1.0である:サンプルⅠ is5.4 to16.2ppbの0ppbのための2.243、1.816 for0.2ppb、1.415 for0.6ppb、0.74 for1.8ppb、0.313 for5.4ppbおよび0.155 for16.2ppb、それに応じて集中範囲、およびサンプルⅡ is0.6への1.8ppbのそれ。

7.2量的な決定
吸光度の価値の平均は最初の標準ソリューション（0の標準）のODの価値（B0）で分けられ、続いて100%までに、すなわち増加するである、サンプルおよび標準ソリューションの平均ODの価値（b）のパーセントと同等

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均（二重井戸） OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
Y-およびＸ軸として標準ソリューションの吸収のパーセントおよびOlaquindoxの標準ソリューション（ng/mL）のsemilogarithmの価値の標準的なカーブを、それぞれ引きなさい。標準的なカーブに吸収のパーセントを組み込むことによって標準的なカーブからのサンプルの対応する集中を読込みなさい。従って生じる価値は対応する希薄の折目によって続いて増加し、最終的にサンプルのOlaquindoxの集中を得る。
専門の分析を使用してこのキットのソフトウェアは多量のサンプルの正確で、急速な分析のためにより便利である。（このソフトウェアのための私達に連絡しなさい）

8. 注意

1. 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす
2.洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる
3.組合せは均等にあらゆる試薬および反応混合物およびmicroplateを完全に洗浄するために、他ではそこに望ましくない再現性である
4。停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである;
5.それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない
6。満期日を超過するキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない
7.この解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄しなさい。0の標準ソリューションの検出の価値はのより少しにより0.5退化を示す
8。最適反作用の温度は37 ℃であり、余りに高いですか余りに低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。