Metronidazole ELISAの抗体の蜂蜜96 Wellsのための速い検出のキット/キットの感受性0.05 Ppb

蜂蜜96 WellsのためのMetronidazole ELISAテスト キット/キットの感受性0.05のppb

1. 主義

このテスト キットはサンプルのMetronidazoleの検出のための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。連結の抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。サンプルのMetronidazoleおよびマイクロよ縞でプリコートされる連結の抗原はMetronidazoleの反抗体のために競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にそれでMetronidazoleの否定的な相関関係がある。この価値は標準的なカーブと比較され、Metronidazoleの集中は続いて得られる。

2. 技術仕様

感受性:0.05ppb
検出限界
蜂蜜:0.1ppbについて
注:ppb= ng/mlかng/g

交さ反応率:
Metronidazole 100%
Ornidazole 83%
Secnidazole 110%
Metronidazoleオハイオ州 <1> Tinidazole <1> Dimetridazole <1>

回復率:90±30%
 

3. 部品

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:microplateの読者（450nm、630nm）は、プリンター、窒素乾燥装置、渦、シェーカー、測定する遠心分離機（3000g以上に）、バランス（0.01 g）の定温器（4℃、25℃）の相互感覚、湯せん、タイマー ピペットで移す;
2） Micropipettors:単一チャネルの20-200 µL、100-1000 µLおよび8チャネル30~300のµl;
3）試薬（AR）:Na2HPO412H2O▪、NaH2PO4·2H2Oの酢酸エチル、ヘキサン、脱イオンされた水。

5. サンプル前処理

指示
次のポイントはの前処理の前にを種類のサンプル取扱われなければならない:
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験装置はきれいでなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル前処理の前の解決の準備:
1）洗浄の緩衝:1部20×は洗浄の緩衝を+脱イオンされた水19部の集中した。
2） 0.2Mはリン酸緩衝液を:25.8g Na2HPO412H2O、▪4.350g NaH2PO4の重量を量りなさい·2H2Oは完全に分解するために、500mlを脱イオンした水を加える。
 

5.1サンプル準備
蜂蜜
1）は50mlプラスチック遠心分離機管に2.0± 0.05gの蜂蜜のサンプルの重量を量る;
次に2）は2ml 0.2Mのリン酸緩衝液を加えたり、8ml酢酸エチルを加えたり、5minのために有機性段階のサンプル接触を完全にするために（または渦を3minのために使用するため）強く揺れる;
3） 5minのための室温の3000 gの上のの遠心分離機;
4） 5ml遠心分離機管（ノートへの移動4mlの層の明確な液体:50-60℃湯せんで乾燥するために層水段階を）、打撃取ってはいけない;
5）は2minのために解決をそれに応じて再溶解する1mlヘキサンおよび0.5mlを強く揺れる加える（または1minのために渦を使用しなさい）;
6） 5minのための室温の3000 gの上のの遠心分離機;
7）不用物の層の有機性段階はテストするために、50ul層の液体を取る。
サンプルの希薄の折目:0.5

6. ELISAのプロシージャ

6.1指示
1）は室温（20-25 ℃）に使用の前にすべての試薬およびマイクロよストリップを持って来る;
2）使用の直後の2-8 ℃へのリターンすべての試薬;
3） ELISAの分析の再現性は、大部分は、版の洗浄の一貫性によって決まる。版の洗浄の正しい操作はELISAの急所プロシージャである;
4）一定した温度の孵化のために、すべてのサンプルおよび試薬は露光量を避けなければなり各microplateはカバー膜によって密封されるべきである。

6.2操作のプロシージャ
1.各試薬が使用の前に均等に混合するために揺れなければならないことに少なくとも30分の室温（20-25 ℃）にテスト キットを、注意する入れる版フレームに必須のマイクロよストリップを持って来なさい。未使用のmicroplate、凍っていなかった2-8 ℃の店を、封じ直した。
2.番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは記録する位置を正副2通りに行われるべきである。
3.別の重複した井戸にサンプルまたは標準ソリューションの50 µLを加えなさい;それから各井戸に抗体の使用液の50 µL、組合せを版を手動で揺することによって穏やかに加えなさい。カバー膜を搭載するmicroplateを密封し、暗闇の60minのための4 ℃で孵化させなさい。
次に4.液体をmicrowellから注ぎ、15-30 sのためのmicroplateを洗浄するために洗浄の緩衝の250 µL/wellを加え、microwellから洗浄の緩衝を注ぎ、3-4回の間このように洗浄するために洗浄の緩衝を加え、次に取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい。
5. 100ul酵素の共役（洗浄のステップの後に結果の相違にmicroplateの鉛の乾燥を避ける長い時間の室温にmicroplateを置いてはいけない）、穏やかの組合せを版を手動で揺することによって加えなさい。カバー膜を搭載するmicroplateを密封し、暗闇の20minのための25 ℃で孵化させなさい。ステップ4.として洗浄。
6.着色:各井戸（ノートに基質Aの解決および基質Bの解決の100ul混合物を加えなさい:1:1の組合せの基質Aの解決そして基質Bの解決は10minで、混合物を使用したり、無効な基質を含むか、またはかき混ぜたり、避けるのに金属を使用しない）。版を手動で揺することによって、カバー膜を搭載するmicroplateが着色のための暗闇で15分の25 ℃で孵化させるシール穏やかに混合しなさい。
7.決定:のµLが各井戸に解決を停止する50を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。首尾よく停止時黄色になる青からの基質色。5分以内の二波長の450/630 nmでODの価値を読むことを推薦しなさい。

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある:最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にMetronidazoleの集中の否定的な相関関係があることノート。

7.1質的な決定
Metronidazoleの集中範囲（ng/mL）は標準ソリューションのそれとサンプルの平均ODの価値を比較することから得ることができる。、サンプルⅡのそれは1.0Ⅰであり、標準ソリューションのODの価値をサンプルのODの価値が0.3であること仮定することは次のとおりである:0ppbのための2.243は、0.05ppbのための1.816、4.05ppbへ0.15ppbのための1.415、0.45ppbのための0.74、1.35ppbのための0.313、4.05ppbのための0.155、それに応じてサンプルⅠの集中範囲1.35であり、サンプルⅡのそれは0.45ppbへ0.05である。

7.2量的な決定
吸光度の価値の平均は最初の標準ソリューション（0の標準）のODの価値（B0）で分けられ、続いて100%までに、すなわち増加する得られる、サンプルおよび標準ソリューションの平均ODの価値（b）のために

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
Y-およびＸ軸として標準ソリューションの吸収のパーセントおよびMetronidazoleの標準ソリューション（ng/mL）のsemilogarithmの価値の標準的なカーブを、それぞれ引きなさい。標準的なカーブに吸収のパーセントを組み込むことによって標準的なカーブからのサンプルの対応する集中を読込みなさい。生じる価値は最終的にサンプルのMetronidazoleの集中を得る対応する希薄の折目によって続いて、増加する。
専門の分析を使用してこのキットのソフトウェアは多量のサンプルの正確で、急速な分析のためにより便利である。（このソフトウェアのための私達に連絡しなさい）。

8. 注意

1. 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2.洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3.均等に組合せは、さもなければそこに望ましくない再現性である。
4。停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5。満期日を超過するキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロットのキットからの試薬を交換してはいけない。
6.それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準ソリューションおよび無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7.この解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄しなさい。標準ソリューション1 （0のppb）の検出の価値はのより少しにより0.5退化を示す。

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。