Phenylethanolamineはミルクの卵の尿の血清のためのELISAテスト キット96人のWells/キットに与える

Phenylethanolamineはミルクの卵の尿の血清のためのELISAテスト キット96人のWells/キットに与える

 

1. 主義

テスト キットはサンプルのPhenylethanolamine Aの検出のための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。活用された抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。サンプルのPhenylethanolamine Aおよびマイクロよ縞でプリコートされる連結の抗原はPhenylethanolamine反Aの抗体のために競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にサンプルでPhenylethanolamine Aの集中の否定的な相関関係がある。価値は標準的なカーブと比較され、Phenylethanolamine Aの集中は続いて得られる。

 

2. 技術仕様

感受性:0.1のppb
定温器の温度:25℃
定温器の時間:30min~15min

検出限界
ティッシュ0.2のppb
0.5のppbに与えなさい

交さ反応:
Phenylethanolamine A 100%
Ractopamine <1> Salbutamol <1> Clenbuterolの <1> 回復率
ティッシュ、供給85±25%

 

3. 部品

 

1	マイクロよストリップ	取り外し可能な8の12のストリップ それぞれ井戸
2	6×標準ソリューション（1mLそれぞれ）	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	酵素の共役	7ml	赤い帽子
4	抗体の使用液	7ml	ブルー キャップ
5	基質A	7ml	白い帽子
6	SubstrateB	7ml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7ml	黄色い帽子
8	20×は洗浄の緩衝を集中した	40ml	白い帽子
9	2×は解決の再溶解を集中した	50ml	透明な帽子

 

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:microplateの読者、プリンター、ホモジェナイザー、窒素乾燥装置、発振器、測定する遠心分離機は、バランス（0.01 g）の定温器の相互感覚ピペットで移す。
2） Micropipettors:単一チャネルの20-200 µLおよび100-1000 µL、および多重チャンネルの30-300 µL;
3）試薬:酢酸エチル、N-hexane、氷酢酸

 

5. サンプル前処理

指示（次のポイントは前処理の前にを取扱われなければならない）
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具はきれいでなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル前処理の前の解決の準備:
1）解決を得るサンプル:99mlに酢酸エチルを取り、氷酢酸1つのmlの加え、そしてよく混合しなさい。
2）解決を再溶解するサンプル:解決を再溶解する2×concentratedはサンプル再溶解のために使用される1:1の脱イオンされた水と（1mLは解決+ 1mLによって脱イオンされた水の再溶解を集中した）薄くなる。

サンプル準備
5.1供給
1.粉砕のサンプルは50ml遠心分離機管に、1.0±0.05gを運ぶ;
2.解決、3分の発振器との振動を得る10のmLのサンプルを加えなさい;
3. 10分の室温の4000 r/minの遠心分離機;
4.窒素とまたは50-60 ℃で空気を乾燥するために2つのmlの上澄み、打撃取りなさい;
5. N-hexane 1つのmlの加え、そして解決、30sのための振動を再溶解する1mlサンプルを加えなさい;
6. 10分の室温の4000 r/minの遠心分離機は、層有機性段階を取除く。
7.分析のための20のµLの層を取りなさい。
サンプルの希薄の折目:5
サンプル妨害があるので（、サンプルによって断ち切られる価値としてrecommend2PPB。）

5.2ティッシュ
1.Take 50ml遠心分離機管への同質な組織サンプル2.0±0.05g;
2.Add解決、2分の発振器との振動を得る8つのmLのサンプル;
10分の室温の4000 r/minの3.Centrifuge;
4.Take窒素とまたは50-60℃で空気乾燥するべき2つのmlの上澄み、打撃;
5.AddはN-hexane 1つのmlの、そして解決、30sのための振動を再溶解する1mlサンプルを加える;
10分の室温の4000 r/minの6.Centrifugeは、層有機性段階を取除く。
分析のための7.Take 20 µLの層。
サンプルの希薄の折目:2
サンプル妨害があるので（、サンプルによって断ち切られる価値としてrecommend1PPB。）

 

6. ELISAのプロシージャ

6.1Instructions
1.使用の前に室温（20-25 ℃）にすべての試薬およびマイクロよストリップを持って来なさい。
2.使用の直後の2-8 ℃へのリターンすべての試薬。
3。ELISAの分析の再現性は、大部分は、版の洗浄の一貫性によって決まる。版の洗浄の正しい操作はELISAのプロシージャの急所である。
4。一定した温度の孵化のために、すべてのサンプルおよび試薬は露光量を避けなければなり各microplateはカバー膜によって密封されるべきである。

6.2Operationプロシージャ
1.少なくとも30分、各々の揺れなければ液体の試薬が使用の前に均等に混合するためにならないノートのための室温（20-25 ℃）にテスト キットを持って来なさい。
2.解決の準備:40ml 20×によって集中される洗浄緩衝を脱イオンされた水と1:19 （1部の20×によって集中される洗浄緩衝+脱イオンされた水19部の）に薄くしなさい、または必要とされる量として準備しなさい。
3.版フレームに必須のマイクロよストリップを入れなさい。2-8 ℃で貯えられた、凍っていなかった未使用のmicroplateを封じ直した。
4.番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りに行われるべきである;位置を記録しなさい。
5.別の重複した井戸にサンプルの50 µLか標準ソリューションを加えなさい;酵素の共役の50 µLを加え、そして各井戸に抗体の使用液の50 µL、シールをカバー膜を搭載するmicroplate、30 min.の25 ℃のandincubate加えなさい。
6.吸収性のペーパーで乾燥するためにmicrowell、折り返しから液体注ぎなさい;脱イオンされた水の250 µL/wellを加え、15-30秒の間洗浄し、次に取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい4-5回を繰り返しなさい。
7.着色:基質Aの解決の50 µLを、各井戸へのBの解決の50 µL加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合し、25 ℃ for15分に着色のための暗闇で孵化させなさい。
8.決定:のµLが各井戸に解決を停止する50を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450 nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分内の二波長の450/630 nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

 

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にサンプルでPhenylethanolamine Aの否定的な相関関係があることノート。

7.1質的な決定
集中範囲（ng/mL）は標準ソリューションのそれとサンプルの平均ODの価値を比較する得られた形態である場合もある。、サンプルⅡのそれは1.0Ⅰであり、標準ソリューションのODの価値をサンプルのODの価値が0.3であること仮定することは次のとおりである:0ppbのための2.243は、0.1ppbのための1.866、0.9ppbへ0.3ppbのための1.415、0.9ppbのための0.864、2.7ppbのための0.413、8.1ppbのための0.155、それに応じてサンプルⅠの集中範囲0.3であり、サンプルⅡのそれは2.7ppbへ8.1ppbである。

7.2量的な決定
最初の標準ソリューション（0の標準）のODの価値（B0）で分けられ、続いて100%、それまでに増加するサンプルおよび標準ソリューションの平均ODの価値（b）のために得られる吸光度の価値の平均はある

 

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

 

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
Y-およびＸ軸として標準ソリューションの吸収のパーセントおよびPhenylethanolamine Aの標準ソリューション（ng/mL）のsemilogarithmの価値の標準的なカーブを、それぞれ引きなさい。標準的なカーブに吸収のパーセントを組み込むことによって標準的なカーブからのサンプルの対応する集中を読込みなさい。生じる価値は最終的にサンプルのPhenylethanolamine Aの実際の集中を得る対応する希薄の折目によって続いて、増加する。
専門の分析を使用してこのキットのソフトウェアは多量のサンプルの正確で、急速な分析のためにより便利である。（このソフトウェアのための私達に連絡しなさい）

8. 注意

1. 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2.洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3.均等に組合せは、完全の洗浄版、版の洗浄の一貫性によってELISAの分析の再現性、大部分は、決まる。
4。解決をである2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避ける停止しなさい。
5。満期日を超過するキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6.それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7.この解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄しなさい。0標準のsolutinの検出の価値のより少しにより0.5 （A450 nm< 0=""> 8。最適反作用の温度は25 ℃であり、余りに高いですか低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

 

 

 

 

 

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

 

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

 

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
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Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

 

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。