ミルクの卵の尿の血清テスト鶏のポーク96 Wells/キットのためのベータ アゴニストELISAのキット

ミルクの卵の尿の血清の鶏のポーク96 Wells/キットのためのベータ アゴニストELISAのキット

 

1. 主義

βアゴニストはサンプルのβアゴニストの検出のための競争の酵素の免疫学的検定にキットを基づいているテストする。連結の抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。マイクロよ縞でプリコートされる反βアゴニストの抗体のためにサンプルおよび連結の抗原のβアゴニストは競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にサンプルでβアゴニストを搭載する否定的な相関関係がある。この価値は標準的なカーブと比較され、βアゴニストの残余は続いて得られる。

 

2. 技術仕様

感受性:0.1のppb
孵化の温度:25℃
孵化の時間:30min~15min

検出限界:
ブタの尿0.3ppb
ポーク0.6ppb

交さ反応率:Clenbuterol 100%、Cimaterol <4>

回復率:
ブタの尿、ポーク90%±30%

 

3. 部品

 

1	マイクロよストリップ	取り外し可能な8の12のストリップ それぞれ井戸
2	6×標準ソリューション（1つのmLそれぞれ）	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	酵素の共役	7ml	赤い帽子
4	抗体の使用液	10ml	ブルー キャップ
5	基質A	7ml	白い帽子
6	SubstrateB	7ml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7ml	黄色い帽子
8	20×は洗浄の緩衝を集中した	40ml	白い帽子
9	解決を得る5×サンプル	50ml	透明な帽子

 

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:microplateの読者、プリンター、ホモジェナイザー、渦、発振器、遠心分離機、測定する定温器は、バランス（0.01 g）の相互感覚ピペットで移す
2） Micropipettors:単一チャネル20-200µL、100-1000µLおよび多重チャンネル30-300µL;
3）試薬:NaOH、HCI。

 

5. サンプル前処理

指示（次のポイントは前処理の前にを取扱われなければならない）
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具はきれいでなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル前処理の前の解決の準備:
1） 0.2M HCI:1Lに脱イオンされた水で17.2mL HCIを分解しなさい。
2） 1M NaOH:100つのmLに脱イオンされた水で4g NaOHを分解しなさい。
3）解決を得るサンプル:解決を得る1部5Xのサンプルは+ 4部水、組合せを均等に脱イオンした。

5.1ブタの尿
20にµLを明確な尿取りなさい、直接検出しなさい（尿が泥でしたり取る、10分の4000 r/minでまたは遠心分離機ろ過しなければならなかったり次に明確な尿を）。使用してはいけない凍結する環境の店。
サンプルの希薄の折目:1

5.2ポーク
1. 2±0.05gの均質にした50ml遠心分離機管に組織サンプルを、加える3ml 0.2M HClの3 min.の振動を重量を量りなさい。
2。それから解決、3minのための振動、10 min.の室温（20-25 ℃）の4000 r/minの遠心分離機を得る600ul 1M NaOHの解決および2.4mlサンプルを加えなさい。
3.分析のための20µL層の液体を取りなさい。（ノート:脂肪質の層が遠心分離機の後にある場合、脂肪質の層を取除けば別の脂肪質の層は、分析のための明確な液体を取る）
サンプルの希薄の折目:4

 

6. ELISAのプロシージャ

6.1Instructions
1.使用の前に室温（20-25 ℃）にすべての試薬およびマイクロよストリップを持って来なさい;
2.使用の直後の2-8 ℃へのリターンすべての試薬;
3。ELISAの分析の再現性は、大部分は、版の洗浄の一貫性によって決まる。版の洗浄の正しい操作はELISAの急所プロシージャである;
4。一定した温度の孵化のために、すべてのサンプルおよび試薬は露光量を避けなければなり各microplateはカバー膜によって密封されるべきである。

6.2Operationプロシージャ
1.各試薬が使用の前に均等に揺れなければならないことに少なくとも30分の室温（20-25 ℃）にテスト キットを、注意する持って来なさい;
2.版フレームに必須のマイクロよストリップを入れなさい。2-8 ℃で貯えられた、凍っていなかった未使用のmicroplateを封じ直した。
3.脱イオンされた水（1部の20Xによって集中される洗浄の緩衝+ 19部によって脱イオンされる水）と1:19に40ml 20Xによって集中される洗浄緩衝を薄くしなさい。または必要とされる量として準備しなさい。
4.番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りに行われるべきである;位置を記録しなさい。
5.サンプルまたは標準ソリューションの20µLを別の重複した井戸に加え、そして酵素の共役、50ul/wellを加えなさい;それから抗体の使用液、80µL/wellを加えなさい。版を、シールmicroplateカバー膜によって手動で揺することによって穏やかに混合しなさい、30 min.の25 ℃で孵化させなさい。
6.液体をmicrowellから注ぎ、洗浄の緩衝、4-5回、1530年代の洗浄の250µL/wellをいつも加え、そして取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい（泡がフラッピングの後にあったら、切るきれいな先端とのそれらを）。
7.着色:基質Aの50µLを加え、そして各井戸に50µL基質Bを加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合し、15 mininのための25 ℃で着色のための暗いの孵化させなさい。
8.決定:の50µLを停止する各井戸に解決を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分内の二波長450/630nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

 

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にサンプルでβアゴニストの集中の否定的な相関関係があることノート。

7.1質的な決定
集中範囲（ng/mL）は標準ソリューションのそれとサンプルの平均ODの価値を比較することから得た。、サンプルⅡのそれは1.0Ⅰであり、標準ソリューションのODの価値をサンプルのODの価値が0.3であること仮定することは次のとおりである:0ppbのための2.243は、0.1ppbのための1.816、8.1ppbへ0.3ppbのための1.415、0.9ppbのための0.74、2.7ppbのための0.313、8.1ppbのための0.155、それに応じてサンプルⅠの集中範囲2.7であり、サンプルⅡのそれは0.9ppbへ0.3である。

7.2量的な決定
最初の標準ソリューション（0の標準）のODの価値（B0）で分けられ、続いて100%、それまでに増加するサンプルおよび標準ソリューションの平均ODの価値（b）のために得られる吸光度の価値の平均はある

 

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

 

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均（二重井戸） OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
Y-およびＸ軸として標準ソリューションの吸収のパーセントおよびβアゴニストの標準ソリューション（ng/mL）のsemilogarithmの価値の標準的なカーブを、それぞれ引きなさい。標準的なカーブに吸収のパーセントを組み込むことによって標準的なカーブからのサンプルの対応する集中を読込みなさい。生じる価値は最終的にサンプルのβアゴニストの集中を得る希薄の折目によって続いて、増加する。

 

8. 注意

25 ℃の下の1.The室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
洗浄プロセスのmicroplateの2.Drynessは非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
均等に3.Mixは、さもなければそこに望ましくない再現性である。
4.The停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5。満期日を超過するキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6.それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7.この解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄しなさい。0の標準ソリューション（0のppb）の検出の価値はのより少しにより0.5退化を示す。
8。最適反作用の温度は25 ℃であり、余りに高いですか余りに低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

 

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注目:マイクロ プレートの真空パックに漏出があれば、マイクロ プレートは正常であり、有効、実験結果に影響を与えてはいけない。使用するために自由に感じなさい。

 

 

 

 

 

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

 

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

 

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

 

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

 

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。