マイコトキシンのOchratoxin A供給穀物96 Wellsのための急速なテスト キット/キットの感受性0.1 Ppb

供給穀物96 WellsのためのELISAテスト キットOchratoxin/キットの感受性0.1のppb

1. 主義および使用法

Ochratoxinは属コウジカビおよびペニシリウムのある特定の種類によって作り出される二次代謝物質である。その中で、ochratoxin Aは最も広く実際のところ配られる、最も強い毒性があり、そして人間、動植物の最も大きい影響がある。
キットは米ヌードル、ピーナツおよび大豆のような穀物そして供給のサンプルのochratoxin （Ochratoxins A、OTA）を検出するのに間接競争ELISAを使用する。キットはプリコートされた抗原の版からおよび酵素の共役、抗体、標準および他の支持の試薬成っている。テストの間に、標準かサンプル解決はochratoxinの抗体と競うために、サンプルのochratoxinおよび版のプリコートされた抗原加えられ酵素の共役を、TMBの基質ショー色によって加えた後、Ochratoxinのサンプル吸光度の価値に標準的なカーブと比較される内容との否定的な相関関係があり、対応によって希薄の要因それから増加されて、サンプルのOchratoxinの内容を引くことができる。

2. 技術仕様

感受性:0.1ppb （ng/ml）

孵化:37℃、30min~30min~15min

検出限界:
穀物1ppb
供給2ppb

交さ反応率
Ochratoxin A 100%

回復率:
穀物、供給85±15%

3. 部品

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:ELISAの読者（450nm/630nm）、プリンター、渦（任意シェーカー）、遠心分離機、バランス:、累進的なピペット敏感な、0.01g量ホモジェナイザー;
2） Micropipettes:単一チャネル20ml | 200ml、100ml | 1000ml、多重チャンネル300ml。
3）試薬:メタノール、NaHCOの₃、脱イオンされた水。

5. サンプル前処理

5.1サンプル前処理の前の解決の準備:
1） 70%Methanol
メタノールの7部+脱イオンされた水の3部;
2） 0.1M NaHCOの₃の解決
4.2g NaHCOの₃の重量を量りなさい、500mlに分解するために脱イオンされた水を加えなさい;
3）洗浄の緩衝
20Xの1部は洗浄の緩衝を集中し、脱イオンされた水の19部と使用可能な洗浄の緩衝を得るために分解する。

5.2準備のofGrain （米、トウモロコシ、キビ等）
1）は50ml遠心分離機管に2g同質なサンプルの、加える10ml 70%のメタノール、5minのための振動、10minのための室温の4000 r/minの遠心分離機を重量を量る;
2）は均等にに1ml層の明確な液体を、加える1ml 0.1M NaHCOの₃の解決を、揺れる取る;
3）はテストするために50ul液体を取る
希薄の要因:10検出限界:1ppb

5.3供給の準備
1）は50ml遠心分離機管に2g同質なサンプルの、加える20ml 70%のメタノール、5minのための振動、10minのための室温の4000 r/minの遠心分離機を重量を量る;
2）は均等にに1ml層の明確な液体を、加える1ml 0.1M NaHCOの₃の解決を、揺れる取る;
3）はテストするために50ul液体を取る
希薄の要因:20検出限界:2ppb

6. ELISAのプロシージャ

1）は少なくとも30分の室温（20-25 ℃）に完全に分解するためにテスト キットを、20Xによって集中される洗浄緩衝結晶化を持つかもしれない時風邪、室温に戻る必要性の店持って来る;各試薬が使用の前に均等に揺れなければならないことに注目しなさい;版フレームに必須のマイクロよストリップを入れなさい。未使用のmicroplate、凍っていない2-8 ℃の店を、封じ直しなさい。
2）番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りに行われるべきである;位置を記録しなさい。
3）は標準/サンプルを加える:サンプルの50 µLか標準ソリューションを別の重複した井戸に加え、そして抗体の使用液、50µL/wellを加えなさい。版を、シールmicroplateカバー膜によって手動で揺することによって穏やかに混合しなさい、暗闇の30分の37℃で孵化させなさい。
4）洗浄microplate:注意深くカバーmembranceを、注ぐmicrowellから液体を開けなさい;洗浄緩衝の350 µL/wellを加え、5回、30sの間いつも十分に洗浄し、そして取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい。（乾燥したの後で泡に穴を開けるのに未使用のやりを使用しなさい）
5）は酵素の共役を加える:酵素の共役、100 µL/wellを加えなさい。版を、シールmicroplateカバー膜によって手動で揺することによって穏やかに混合しなさい、暗闇の37℃ for30分に孵化させなさい。
ステップ4）として洗浄。
6）着色:各井戸に基質Aの50 µLをそして50のµLの基質B加えなさい。15 mininのための37℃で版を手動で揺することによって、andincubate着色のための暗いの穏やかに混合しなさい。青い色が適切に延長であるには余りにも軽ければ（、点爆時間はできる）
7）決定:のµLが各井戸に解決を停止する50を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（10分内の二波長450/630nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

7. 結果の判断

サンプルの集中を計算するためには、標準的なカーブは作られるべきである。標準的なカーブが作られる前に、吸光度%のの概念は知られているべきである。
吸光度%のの計算:

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値。
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値。
ゼロ標準はこうして100%と等しくなされ、吸光度の価値はパーセントで引用される。価値はochratoxin Aの集中[μg/kg]に対するsemilogarithmic方眼紙の座標のシステムで標準のために入られる計算した。各サンプルの吸光度に相当するμg/kg （ppb）のochratoxin Aの集中は校正曲線から読むことができる。
ELISAの結果の分析のための特別なソフトウェアは二重か多数の決定を促進する。必要としたら、要求するために呼びなさい。

8. 注意

1） 25 ℃の下の室温か室温（25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2）洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;そう洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3）均等に組合せ試薬を加える前に。
4）停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5）は満期日を超過するキットを使用しない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6）貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7）はこの解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄する。0の標準ソリューション（0のppb）の検出の価値（450/630nm）のより少しにより0.5 （（A450nm<0>

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。