供給のトウモロコシ96 Wells/キットのための0.1ppb Zearalenoneのマイコトキシンのテストのキット

供給のトウモロコシ96 WellsのためのZearalenone ELISAテスト キット/キットの感受性0.1のppb

 

1. 主義

このテスト キットはZearalenoneの検出のための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。連結の抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。サンプルのZearalenoneおよびマイクロよ縞でプリコートされる連結の抗原はZearalenoneの反抗体のために競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にサンプルでZearalenoneの否定的な相関関係がある。この価値は標準的なカーブと比較され、Zearalenoneの残余は続いて得られる。

2. 技術仕様

感受性:0.1のppb
定温器の温度:25℃
定温器の時間:30min~15min

検出限界:
供給10ppb
米、トウモロコシ、ピーナツ5ppb

交さ反応率:
Zearalenone 100%

回復率:
供給、米、ピーナツ、トウモロコシ100±30%

3. 部品

 

 

1	マイクロよストリップ	それぞれ8つの取り外し可能な井戸が付いている12のストリップ
2	6×標準ソリューション（1つのmLそれぞれ）	0のppb	0.1のppb
		0.3のppb	0.9のppb
		2.7 ppb	8.1 ppb
3	酵素の共役	7つのml	赤い帽子
4	抗体の使用液	7つのml	ブルー キャップ
5	基質A	7つのml	白い帽子
6	SubstrateB	7つのml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7つのml	黄色い帽子
8	20Xは洗浄の緩衝を集中した	40のml	白い帽子
9	2Xは解決の再溶解を集中した	50のml	透明な帽子

 

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:ELISAの読者（450 nm/630nm）、ホモジェナイザー、シェーカー、遠心分離機、バランス:、窒素乾燥装置敏感な、0.01g量定温器、累進的なピペット、プリンター
2） Micropipettes:単一チャネル20l | 200l、100l | 1000lの多重チャンネルの30~300 μl
3）試薬:メタノール、n-hexane。

5. サンプル前処理

指示（次のポイントは前処理の前にを取扱われなければならない）
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具はきれいでなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル前処理の前の解決の準備:
解決第1:再溶解を見本抽出しなさい
解決を再溶解する2×concentratedはサンプル再溶解のために使用される1:1の脱イオンされた水と（1partは解決+ 1partによって脱イオンされた水の再溶解を集中した）薄くなる。
解決第2:サンプル エキスの解決
メタノールの7部+使用可能なサンプル エキスの解決を得る脱イオンされた水の3部。

サンプル準備
5.1供給のサンプルの準備
1）は50ml遠心分離機管に1.0±0.05gをgrinded供給のサンプルを、加える5mlサンプル エキスの解決を取る;
2） 3min （または5minの上でのために手で揺れるため）、10分の20℃の4000r/minの上のの遠心分離機のための完全の振動;
3）取得50ul上澄み（層）は均等にに、再溶解する950ulサンプルを揺れる加える;
4）はテストするために50μlを取る
希薄の要因:100
注:サンプルの薬剤の残余の集中がカーブの範囲からあれば、サンプルはテストのために更に薄くすることができる（例えば:50ul上澄み（層）を新しい遠心分離機管に運びなさい、1450ulを脱イオンした水を、希薄の要因である150加えなさい）。

トウモロコシ、米のサンプルの5.2Preparation
1）は50ml遠心分離機管に1.0±0.05gをgrindedサンプルを取る;5mlサンプル エキスの解決を加えなさい;
2） 3min （または5minの上でのために手で揺れるため）、10分の20℃の4000r/minの上のの遠心分離機のための完全の振動;
3）取得100ul上澄み（層）は均等にに、再溶解する900ulサンプルを揺れる加える;
4）はテストするために50μlを取る
希薄の要因:50
注:サンプルの薬剤の残余の集中がカーブの範囲からあれば、サンプルはテストのために更に薄くすることができる（例えば:50ul上澄み（層）を新しい遠心分離機管に運びなさい、950脱イオンされた水を、希薄の要因ある加えなさい100）。

ピーナツ サンプルの5.3Preparation
1）は50ml遠心分離機管に1.0±0.05gをgrindedピーナツ サンプルを取る;5mlサンプル エキスの解決を加え、そして4ml n-hexaneを加えなさい;
2） 3min （または5minの上でのために手で揺れるため）、10分の20℃の4000r/minの上のの遠心分離機のための完全の振動;
3）不用物の層の明確な液体は均等にに、100ul中間層の液体を、加える再溶解する900ulサンプルを揺れる取る;
4）はテストするために50μlを取る
希薄の要因:50
注:サンプルの薬剤の残余の集中がカーブの範囲からあれば、サンプルはテストのために更に薄くすることができる（例えば:50ul中間層の液体を新しい遠心分離機管に運びなさい、950脱イオンされた水を、希薄の要因である100加えなさい）。

 

6. ELISAのプロシージャ

6.1指示
1.室温（20 -使用にELISAの試薬をの前の25 °C）持って来なさい。
2.使用の直後の2-8 ℃に戻ってELISAの試薬を置きなさい
3。分析プロセスのELISAの再現性は洗浄の版の一貫性によって主として決まる、正しい洗浄の版操作である決定ELISAプログラムのポイントある
4。一定した温度の孵化のすべてのプロセスでは、露光量、シールをカバー膜を搭載するmicroplate避けなさい。

6.2操作のプロシージャ

1. 各試薬がよりかなり前に揺すられた使用でなければならないことに室温にキットを置きなさい（20-25°C）少なくとも30分の間、注目しなさい;
2.場所版フレームの望ましいmicrowellのストリップ。未使用のmicroplatesは凍っていない2-8°Cで、封じ直され、貯えられるべきである。
3.解決の準備:20×の40mlを集中し、洗浄の緩衝をそれを1:19 （20×によって集中される洗浄緩衝の1部+脱イオンされた水の19部）の比率で脱イオンされた水で分解するために、または必要に応じて準備する取りなさい。
4.番号付け:サンプルおよび標準ソリューションに従ってmicrowellsに番号を付けなさい;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りにされるべきである;位置を記録しなさい。
5.標準/サンプルを加えなさい:サンプルの50 µLを加えれば二重井戸を分ける標準ソリューションはそれから酵素の共役、50 µL/wellを加える;そして抗体の使用液、50 µL/well。版、シールを手で揺することによってmicroplateカバー フィルムと穏やかに混合し、暗闇の30分の25 °Cで孵化させなさい。
6.洗浄microplate:注意深くカバー フィルムを開け、microwellの液体を注ぎなさい;洗浄緩衝の250 µL/wellを加えなさい、15-30 sのための完全に4-5回をいつも洗浄しなさい、次に乾燥している吸収性のペーパーPatとそれを取除きなさい。（乾燥の後で未使用のやりが付いている気泡を突き刺しなさい）
7.色の開発:版を手で揺することによって解決B. Mixの50 µLに穏やかに先行している基質Aの解決の50 µLを各井戸に加え、15分の間汚損のための暗闇の25 °Cで孵化させなさい。
8.試金:各井戸に停止解決の50 µLを加えなさい。版を手で揺することによって穏やかに混合しなさい。各井戸のODの価値を定めるために450 nmにmicroplateの読者の波長を置きなさい。（450/630 nm二重波長でODの価値を5分以内の読むことを推薦する）。

 

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にサンプルでZearalenoneの否定的な相関関係があることノート
7.1質的な決定
集中範囲（ppb）は標準と比較されるによって平均吸光度の価値得ることができる。サンプル1の吸光度が価値0.3であることを仮定しなさい、サンプル2は1.0であり、標準は次のとおりである:2.243の0ppb;1.816の0.1ppb;1.415の0.3ppb;0.74の0.9ppb;0.313の2.7ppb;0.155の8.1ppb。サンプル1の集中は2.7ppb | 8.1ppbの範囲にそれからある;サンプル2は0.3ppb | 0.9ppbである。サンプルのZearalenoneの集中範囲はサンプルの対応する希薄によって増加されるによって得ることができる。
7. 2定量分析
サンプルの集中を計算するためには、標準的なカーブは作られるべきである。標準的なカーブが作られる前に、吸光度%のの概念は知ることべきである。
吸光度%のの計算:

 

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
ゼロ標準はこうして100%と等しくなされ、吸光度の価値はパーセントで引用される。価値はZearalenoneの集中[ng/mL]に対するsemilogarithmic方眼紙の座標のシステムで標準のために入られる計算した。各サンプルの吸光度に相当するng/mlのZearalenoneの集中は校正曲線から読むことができる。
ELISAの結果の分析のための特別なソフトウェアは二重か多数の決定を促進する。必要としたら、要求するために呼びなさい。

8. 注意

1. 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2.洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3.均等に組合せ試薬を加える前に。
4。停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5。満期日を超過するキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6.貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7.この解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄しなさい。0の標準ソリューション（0のppb）の検出の価値（450/630nm）のより少しにより0.5 （（A450nm<0> 8。最適反作用の温度は25 ℃であり、余りに高いですか余りに低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

9. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

 

 

 

 

 

 

 

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

 

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

 

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

 

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

 

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。