トウモロコシのティッシュ96 Wells/キットのための30minアフラトキシン ピーナツElisaのマイコトキシンのテストのキット

供給のトウモロコシ ピーナツ ティッシュ96 Wells/キットのための総アフラトキシンELISAテスト キット

 

1. マイコトキシンのテストのキットの主義

このキットは総アフラトキシンの検出のための間接競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。活用された抗原はmicrowellのストリップでプリコートされる。サンプルのアフラトキシンは反アフラトキシンの抗体のためにmicrowellのストリップでプリコートされる活用された抗原と競う。酵素の共役が加えられた後、TMBの基質は汚損のために加えられる。サンプルの光学濃度（OD）の価値はサンプルのアフラトキシンに否定的に関連する。この価値は標準的なカーブと比較され、残りのアフラトキシンのレベルはそれから得られる。

 

2. 技術仕様

感受性:0.02のppb
定温器の温度:25℃
文化時間:30min~15min
検出限界:
供給、米、トウモロコシ、ピーナツ、ティッシュ、食用油2ppb
交さ反応率:
アフラトキシンB1 100%
アフラトキシンM1 91.2%
アフラトキシンB2 68.4%
アフラトキシンG1 4.7%
アフラトキシンG2 2.7%
回復率:
供給、米、トウモロコシ、ピーナツ、ティッシュ、食用油95±35%

 

3. マイコトキシンのテストのキットの部品

 

1	マイクロよストリップ	それぞれ8つの取り外し可能な井戸が付いている12のストリップ
2	6×標準ソリューション（1つのmLそれぞれ）	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	酵素の共役	7ml	赤い帽子
4	抗体の使用液	7ml	ブルー キャップ
5	基質A	7ml	白い帽子
6	基質B	7ml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7ml	黄色い帽子
8	20×は洗浄の緩衝を集中した	40ml	白い帽子
9	20×は解決の再溶解を集中した	50ml	透明な帽子

 

4. サンプル準備

使用説明（次のポイントは調査分析する前にを取扱われなければならない）
1）実験は使い捨て可能な先端しか使用なでき異なった試薬を吸い出した場合先端は取り替えられなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具は必要ならばきれいになり、再きれいにならなければならない。

サンプル前処理の前の解決の準備:
1）サンプル分解の解決
1部20Xを集中した解決の再溶解を使用すれば19部と分解するために水を解決を再溶解する使用可能なサンプルを得るために脱イオンした。
2）サンプル エキス
メタノール7部の使用し、3部で脱イオンした使用可能なサンプル エキスのための水を分解しなさい。

サンプル準備
4.1ティッシュ、供給、米およびトウモロコシのサンプルの準備
1）は50ml遠心分離機管に地上のサンプルの1.0±0.05gを、加えるサンプル エキス、3minのための振動、4000r/minの上の10minのための20°Cの遠心分離機の5mlを入れた;
2）は100ul上澄みを、加える解決を再溶解する700ulサンプルをよく揺れる取る;
3）はテストのための50μlを取る
希薄の要因:40

4.2食用油のサンプルの準備
1）は50ml遠心分離機管に1.0±0.05gに食用油のサンプルを運ぶ;サンプル エキスの5mlを加え、そしてn-hexane、3minのための振動、10minのための20℃の4000r/minの遠心分離機の4mlを加えなさい;
2）不用物は上澄み、中間の層の解決の100ulを取り、解決を再溶解するサンプルの700ulを加えそしてよく揺れる;
3）はテストのための50μlを取る
希薄の要因:40

4.3ピーナツ サンプルの準備
1）置かれた1.0±0.05gピーナツは50ml遠心分離機管にサンプルを押しつぶした;サンプル エキスの5mlを加え、そしてn-hexane、3minのための振動、10minのための20℃の上の4000r/minの遠心分離機の4mlを加えなさい;
2）不用物は上澄み、中間の層の解決の100ulを取り、解決を再溶解するサンプルの400ulを加えそしてよく揺れる;
3）はテストのための50μlを取る
希薄の要因:25

 

5. ELISAのプロシージャ

5.1使用説明
1）は室温（20 -使用にELISAの試薬をの前の25 °C）持って来る。
2）は使用の直後の2-8°Cに戻ってELISAの試薬を置いた。
3） ELISAの分析プロセスの再現性は版の洗浄の一貫性によって主として決まり、正しい版の洗浄操作はELISAのプロシージャの決定の焦点である。
4）一定した温度の孵化のすべてのプロセスの間に、ライトを避け、カバー フィルムが付いているmicroplateを密封しなさい。

5.2操作のプロシージャ
1）は少なくとも30分の室温（20-25 ℃）に各試薬が使用の前に均等に揺れなければならないことにテスト キットを、注意する持って来る;
2）は版フレームに必須のマイクロよストリップを入れた。2-8 ℃で貯えられた、凍っていなかった未使用のmicroplateを封じ直した。
3）解決の準備:40ml 20×によって集中される洗浄緩衝を取りなさい、脱イオンされた水と1:19 （1部の20×によって集中される洗浄緩衝+脱イオンされた水19部の）に分解しなさい、または必要とされる量として準備しなさい。
4）番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りに行われるべきである;位置を記録しなさい。
5）は標準/サンプルを加える:サンプルの50 µLか標準ソリューションを別の重複した井戸に加え、そして酵素の共役、50 µL/wellを加えなさい;そして抗体の使用液、50 µL/well。版を、シールmicroplateカバー膜によって手動で揺することによって穏やかに混合しなさい、暗闇の30分の25°Cで孵化させなさい。
6）洗浄microplate:注意深くカバーmembranceを、注ぐmicrowellから液体を開けなさい;洗浄緩衝の250 µL/wellを加え、4-5回、15-30 sの間いつも十分に洗浄し、そして取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい。（乾燥したの後で泡に穴を開けるのに未使用のやりを使用しなさい）
7）着色:各井戸に基質Aの解決の50 µLをそして50のµL Bの解決加えなさい。着色のための暗闇の15minのための25°Cで版を手動で揺することによって、andincubate穏やかに混合しなさい。
8）決定:のµLが各井戸に解決を停止する50を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450 nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分内の二波長の450/630 nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

 

6. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にサンプルで総アフラトキシンとの否定的な相関関係があることノート。

6.1質的な決定
集中範囲（ppb）は標準と比較されるによって平均吸光度の価値得ることができる。サンプル1の吸光度が価値0.3であることを仮定しなさい、サンプル2は1.0であり、標準は次のとおりである:2.243の0ppb;1.816の0.02ppb;1.415の0.06ppb;0.74の0.18ppb;0.313の0.54ppb;0.155の1.62ppb。サンプル1の集中は0.54ppb | 1.62ppbの範囲にそれからある;サンプル2は0.06ppb | 0.18ppbである。サンプルの総アフラトキシンの集中範囲はサンプルの対応する希薄によって増加されるによって得ることができる。

6. 2定量分析
サンプルの集中を計算するためには、標準的なカーブは作られるべきである。標準的なカーブが作られる前に、吸光度%のの概念は知ることべきである。
吸光度%のの計算:

 

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

 

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値。
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値。
ゼロ標準はこうして100%と等しくなされ、吸光度の価値はパーセントで引用される。価値は総アフラトキシンの集中[ng/L]に対するsemilogarithmic方眼紙の座標のシステムで標準のために入られる計算した。各サンプルの吸光度に相当するng/L （ppb）の総アフラトキシンの集中は校正曲線から読むことができる。
ELISAの結果の分析のための特別なソフトウェアは二重か多数の決定を促進する。必要としたら、要求するために呼びなさい。

7. 注意

1） 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2）洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3）均等に組合せ試薬を加える前に。
4）停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5）は満期日を超過するキットを使用しない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6）貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7）はこの解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄する。0の標準ソリューション（0のppb）の検出の価値（450/630nm）のより少しにより0.5 （（A450nm<0> 8）は最適反作用の温度25 ℃であり、余りに高いですか余りに低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

8. 貯蔵および満期日

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

 

 

 

 

 

 

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

 

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

 

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

 

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

 

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。