供給の米3ppbのためのTrichothecenesのT2ピーナツ テスト キットELISAのアフラトキシンの試験装置

供給ピーナツ米96 Wells/キットのためのTrichothecenes （T2） ELISAテスト キット

 

1. 主義

このテスト キットはTrichothecenes （T2）の検出のための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。連結の抗原はマイクロよ縞でプリコートされる。サンプルのTrichothecenes （T2）およびマイクロよ縞でプリコートされる連結の抗原はTrichothecenes反（T2）の抗体のために競う。酵素の共役の付加が着色のために、TMBの基質加えられた後。サンプルの光学濃度（OD）の価値にサンプルでTrichothecenes （T2）の否定的な相関関係がある。この価値は標準的なカーブと比較され、Trichothecenes （T2）の残余は続いて得られる。

 

2. 技術仕様

感受性:0.05のppb
定温器の温度:25℃
定温器の時間:30min~15min
検出限界:
供給、ピーナツ、米3ppb
交さ反応率:
Trichothecenes （T2） 100%
回復率:
供給、米90±25%
ピーナツ85±25%

 

3. 部品

 

1	マイクロよストリップ	それぞれ8つの取り外し可能な井戸が付いている12のストリップ
2	6×標準ソリューション（1つのmLそれぞれ）	0ppb	0.05ppb
		0.15ppb	0.45ppb
		1.35ppb	4.05ppb
3	酵素の共役	7ml	赤い帽子
4	抗体の使用液	7ml	ブルー キャップ
5	基質A	7ml	白い帽子
6	SubstrateB	7ml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7ml	黄色い帽子
8	20×は洗浄の緩衝を集中した	15ml	白い帽子
9	5×は解決の再溶解を集中した	50ml*2	透明な帽子

 

4. 必要なが、提供されない材料

1) 装置:ELISAの読者（450 nm/630nm）、ホモジェナイザー、シェーカー、遠心分離機、バランス:、窒素乾燥装置敏感な、0.01g量定温器、累進的なピペット、プリンター
2） Micropipettes:単一チャネル20ml | 200ml、100ml | 1000mlの多重チャンネルの30~300 μl
3）試薬:メタノール。

5. サンプル前処理

指示（次のポイントは前処理の前にを取扱われなければならない）
1）使い捨て可能な先端しか実験に使用することができ、異なった試薬を吸収するために使用されたとき先端は変わらなければならない;
2）実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、各々の実験道具はきれいでなければなり、必要ならば再きれいになるべきである。

サンプル前処理の前の解決の準備:
1） Sampleredissolvingの解決
（5X）集中されるの1部を使用すれば解決を解決を再溶解する使用可能なサンプルを得るために脱イオンされた水の4部と分解するために再溶解する。
2）サンプル エキスの解決
メタノールの1部を使用し、使用可能なサンプル エキスの解決を得るために解決を再溶解するサンプルの1部と分解しなさい。
供給、ピーナツ、米のサンプルの準備

1) 取得1.0±0.05gは50ml遠心分離機管にサンプルを、加える5mlサンプル エキスの解決、3minのための振動、10分の20℃の4000r/minの上のの遠心分離機をgrinded;
2）取得100ul上澄み（層）は均等にに、解決を再溶解する400ulサンプルを揺れる加える;
3）はテストするために50μlを取る
希薄の要因:25

 

6. ELISAのプロシージャ

6.1指示

1）は室温（20 -使用にELISAの試薬をの前の25 °C）持って来る。
2）は使用の直後の2-8 ℃に戻ってELISAの試薬を置いた
3）分析プロセスのELISAの再現性は洗浄の版の一貫性によって主として決まる、正しい洗浄の版操作である決定ELISAプログラムのポイントある
4）一定した温度の孵化のすべてのプロセスで、露光量、シールをカバー膜を搭載するmicroplate避けなさい。

6. 2つの操作のプロシージャ

1）は少なくとも30分の室温（20-25 ℃）に各試薬が使用の前に均等に揺れなければならないことにテスト キットを、注意する持って来る;
2）は版フレームに必須のマイクロよストリップを入れた。2-8 ℃で貯えられた、凍っていなかった未使用のmicroplateを封じ直した。
3）解決の準備:15ml 20×によって集中される洗浄緩衝を取りなさい、脱イオンされた水と1:19 （1部の20×によって集中される洗浄緩衝+脱イオンされた水19部の）に分解しなさい、または必要とされる量として準備しなさい。
4）番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは正副2通りに行われるべきである;位置を記録しなさい。
5）は標準/サンプルを加える:サンプルの50 µLか標準ソリューションを別の重複した井戸に加え、そして酵素の共役、50 µL/wellを加えなさい;そして抗体の使用液、50 µL/well。版を、シールmicroplateカバー膜によって手動で揺することによって穏やかに混合しなさい、暗闇の30分のためのat25 °Cを孵化させなさい。
6）洗浄microplate:注意深くカバーmembranceを、注ぐmicrowellから液体を開けなさい;洗浄緩衝の250 µL/wellを加え、4-5回、15-30 sの間いつも十分に洗浄し、そして取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい。（乾燥したの後で泡に穴を開けるのに未使用のやりを使用しなさい）
7）着色:各井戸に基質Aの解決の50 µLをそして50のµL Bの解決加えなさい。版を手動で揺することによって、15mininのためのandincubate at25の°C着色のための暗闇穏やかに混合しなさい。
8）決定:のµLが各井戸に解決を停止する50を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450 nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分内の二波長の450/630 nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

 

7. 結果の判断

結果を判断する2つの方法がある;最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にサンプルでTrichothecenes （T2）の否定的な相関関係があることノート
7.1質的な決定
集中範囲（ppb）は標準と比較されるによって平均吸光度の価値得ることができる。サンプル1の吸光度が価値0.3であることを仮定しなさい、サンプル2は1.0であり、標準は次のとおりである:2.243の0ppb;1.816の0.05ppb;1.415の0.15ppb;0.74の0.45ppb;0.313の1.35ppb;0.155の4.05ppb。サンプル1の集中は1.35ppb | 4.05ppbの範囲にそれからある;サンプル2は0.15ppb | 0.45ppbである。サンプルのTrichothecenes （T2）の集中範囲はサンプルの対応する希薄によって増加されるによって得ることができる。
7. 2定量分析
サンプルの集中を計算するためには、標準的なカーブは作られるべきである。標準的なカーブが作られる前に、吸光度%のの概念は知ることべきである。
吸光度%のの計算:

 

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

 

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値
0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値
ゼロ標準はこうして100%と等しくなされ、吸光度の価値はパーセントで引用される。価値はTrichothecenes （T2）の集中[ng/mL]に対するsemilogarithmic方眼紙の座標のシステムで標準のために入られる計算した。各サンプルの吸光度に相当するng/mLのTrichothecenes （T2）の集中は校正曲線から読むことができる。
ELISAの結果の分析のための特別なソフトウェアは二重か多数の決定を促進する。必要としたら、要求するために呼びなさい。

 

8. 注意
1） 25 ℃の下の室温か室温（20-25 ℃）に戻らないより低い標準的なODの価値を試薬およびサンプルの温度はもたらす。
2）洗浄プロセスのmicroplateの乾燥は非線形標準的なカーブおよび望ましくない再現性を含む状態と一緒に伴われる;従って洗浄の直後の次のステップに進みなさい。
3）均等に組合せ試薬を加える前に。
4）停止解決は2つのMの硫酸の解決、皮と連絡することを避けるである。
5）は満期日を超過するキットを使用しない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更をもたらす。使用するために異なったロット番号のキットからの試薬を交換してはいけない。
6）貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。それを封じ直すために自動シーリング袋に未使用のmicroplateを入れなさい。前の標準試料および無色色は感光型であり、こうしてライト--に直接さらすことができない。
7）はこの解決の退化を示すあらゆる色の着色の解決を放棄する。0の標準ソリューション（0のppb）の検出の価値（450/630nm）のより少しにより0.5 （（A450nm<0> 8）は最適反作用の温度25℃であり、余りに高いですか余りに低温は検出の感受性およびODの価値の変更で起因する。

 

9. 貯蔵および満期日
貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。
満期日:12か月;生産の日付は箱にある。
注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

 

 

 

 

 

 

 

 

Q1:あなたは出荷するためにどの位の時間を要するか。
A1:通常7仕事日以内の船。

 

Q2:OEM/ODMを支えるか。
A2:支えることができる。私達はあなたの特定の必要性および特定の量に従ってカスタマイズしてもいい。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達にISO9001証明があり、ISO13485証明、これまでのところすべての工程、標準的な規則がある、私達は政府の関連した行動そして法律に従う。

 

Q4:売り上げ後のサービスは保証されるか。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。プロダクトが実験の間に失敗すれば、私達は提供してもいい
電話、ビデオおよび他の形態を通した1対1の指導。

 

Q5:あなたの最低順序量は何であるか。
A5:1Kit.

 

Q6:出荷方法は何であるか。
A6:それは明白によって（FEDERAL EXPRESS、UPS、DHL、EMS、等）または空気および地面によって出荷することができる。順序を置く前に私達と確認しなさい。