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サンプル: | 動物血清 | 指定: | 96ウェル/キット |
---|---|---|---|
キー ワード: | 狂犬病ウイルス抗体ELISAキット | タイプ: | ペット迅速検査 |
保存性: | 12か月 | 店: | 2~8℃暗所、凍結なきこと |
ハイライト: | 狂犬病ELISAテスト キット,犬ELISAテスト キット,RBVペット急速なテスト |
ペット96 Wells/キットGMP ISO9001のための狂犬病ウイルスの抗体ELISAのキット
1. 導入
狂犬病ウイルス(RBV)の抗体ELISAのキットが狂犬病のワクチン接種の状態を査定するのに使用される犬、猫等の血清の狂犬病ウイルスの抗体をテストするのに使用されている。
このキットの使用ブロックELISA方法、狂犬病の抗原は酵素のマイクロよストリップでプリコートされる。テストした場合、狂犬病ウイルスの特定の抗体があったら、孵化の後で、薄くされた血清のサンプルを、それ結合するプリコートされた抗原と、洗浄の非結合抗体そして他の部品を放棄するために加えなさい;それからモノクローナル抗体およびプリコートされた抗原の組合せを妨げるために酵素によって分類されるanti-rabiesウイルスのモノクローナル抗体、サンプルの抗体を加えなさい;洗浄の非結合酵素の共役を放棄しなさい;酵素の触媒作用によってマイクロ井戸のTMBの基質を、停止解決を反作用を停止するために加えた後吸光度を反作用の井戸の価値測定する青い信号あるサンプル、450nm wavelenthの使用ELISA読者の抗体の内容の反対の割合に加えなさい。
2. 試薬および目次
コード | 項目 | Spec. | コード | 項目 | Spec. |
1 | RBV-AgCoatedplates |
1/2の版の 96の井戸 |
6 | 解決を停止しなさい | 11のml |
2 | EnzymeConjugate | 11/22のml | 7 | 否定的な制御 | 1/2ml |
3 | 10Xは洗浄の緩衝を集中した | 100つのml | 8 | 肯定的な制御 | 0.5/1 ml |
4 | 基質 | 11/22のml | 9 | 付着力ホイル | 2/4部分 |
5 | サンプル希釈剤 | 100つのml | 10 | 説明書 | 1部分 |
3. Materialrequiredはnotprovided
1) Micropipette:10ul-100ul、100ul-1000ul。
2)使い捨て可能なピペットの先端。
3)卒業生:500ml.
4) Microplateの読者:96の井戸。
5)蒸留水か脱イオンされた水。
6) Microplateの洗濯機
4. サンプル準備
動物の全血を、得る規則的な方法の使用によって血清を明るいもし、溶血無し、血清取りなさい
5. 洗浄の緩衝準備
塩の水晶があれば、リターン10Xは使用の前に室温に分解した洗浄の緩衝を揺れるそれを作るためにそしてそれ蒸留水との10時に希薄または脱イオンされた水集中した。薄くされた洗浄の緩衝は4℃forで貯えることができる約1週。
6. ノート
1) すべての試薬を室温に使用の前に戻し、使用の前にそれ、そして2-8℃after使用法に戻って店を均等に揺すり。
2)は異なったキットからの使用試薬を混合しないし、使用するとき別のロットNOは、試薬を汚されて防ぐ。
3)基質Aおよび停止解決は皮に苛立ちがあるかもしれ、目は、使用するように気を付ける。
4)は強いライト--に基質をさらさないし、オキシダントが付いている接触を避けない。
5) RBV Agは版に密封され、moisture-proofべきである塗った。MicroWellの背部未使用の版を乾燥したホイル袋に入れ、2~8 ℃で密封した。
放棄する前にpullutionを避けるために6)すべての無駄はよく扱われるべきである。
7)操作指示を含む厳密な承諾は最もよい結果を得ることができる。操作を、全プロセスのタイミング ピペットで移しておよび洗浄は精密でなければならない。
8) RBV Agは版にである使い捨て可能、繰り返さない使用を塗った。
7. 試験手順
1) あらゆるテスト、セット1よく否定的な制御の肯定的な制御そして2つの井戸のために、否定的な制御および肯定的な制御のために100ul/well加えるために、に直接対応する井戸薄くなる、必要はあってはいけない;
2)は反作用の井戸、80ul/wellにサンプル希釈剤を加え、そして血清、20ul/wellの打撃を加え、そしてに打った。(使用を先端混合してはいけない);
3)は付着力ホイル、30分のincubateat 37の℃でそれを覆う;
4)は各井戸に吸収性のペーパーと乾燥する付着力ホイルを、放棄する井戸の液体を、加える薄くされた洗浄緩衝、250ul/wellを、放棄する液体を、繰り返す5回のための上記のステップ、ついに折り返しを開ける;
5)酵素の共役を、100ul/wellは加えて付着力ホイル、incubateat 37の℃ for30分で、それを覆う;
6)開いた付着力ホイルは吸収性のペーパーと乾燥するために、ステップ4)として5回の間洗浄する井戸の液体をついに覚えている折り返しを放棄する;
7)は基質、100ul/wellを、均等に混合する付着力ホイル、incubateat 37の℃in darkfor15分でそれを覆うためにそれをそして加える;
8)は反作用を停止するために停止解決、50ul/wellを測定する10分の結果を加える。
8. 結果の判断
450nm (参照として630nm)でODの価値を読みなさい。
有効である試金のため:
否定的な制御のODの価値(その間N) > 0.5、肯定的な価値(p)妨害率> 60%
方法を計算しなさい:
PI (妨害率) = 1 - (サンプルODは否定的な制御OD平均値を評価する)
Resultsinterpretation
PI (妨害率) > 60%:陽性
PI (妨害率) ≤60%:陰性
(ノート:PI=60%のそれが抗体の力価0.5 IU/mlを意味する時)
9. 貯蔵および日付切れるため
暗闇の2~8℃、凍結する無しの満期日の店:12か月。
Pathogeny
- それは動物を通した人間に狂犬病ウイルスの伝達によって主に引き起こされる。狂犬病ウイルスは5つの蛋白質、(m)即ち糖蛋白質(G)、nucleoprotein (n)、ポリメラーゼ(l)、リン蛋白質(NS)およびマトリックスを含んでいる。狂犬病ウイルスの糖蛋白質は狂犬病ウイルスのneuroticismを定めるアセチルコリンと結合できる。主要な感染源は病気猫および病気のオオカミに先行させている病気犬である。人が病気動物によってかまれた後、動物の唾液のウイルスは傷を通して人体を書き入れ、病気を引き起こす。少数の患者はまた結膜が病気動物の唾液によって汚染されるので病気になることができる。
- 人々はハンター、獣医および動物繁殖動物はより敏感であるが、一般に狂犬病に敏感である。狂犬病ウイルスが人体を書き入れた後、最初に筋肉細胞を感染させ、筋肉細胞の少量で傷の近くで増殖し、そして次に近くの周辺神経に侵入する。それから、ウイルスは周辺神経の軸線に沿う中央神経に広がり、血に伸びない。それは主に脳幹および小脳のニューロンに侵入する。ウイルスは灰白質の多くで複製し、神経に沿う唾液腺、角膜、鼻の粘膜、肺、皮および他の部分に達する。ホストへの狂犬病ウイルスの主要な損傷は細胞の放棄された蛋白質の貝の蓄積によって形作られるeosinophilic粒子である小胞体から来る。小胞体は患者の中央神経質な細胞で広く配られ、また病気の実験室の診断の表示器である。
- 伝染の後で、すべての人々が病気にならない。約予防の注入なしで病気犬によってかまれる15% -人々の20%病気に、および約病気のオオカミによってかまれる50%なる-人々の60%は病気になる。発生要因は衣類のかみ傷の場所、傷つけられた程度、傷つけられた処置、厚さおよびワクチン接種と関連している。
Q1:あなたは出荷するためにどの位の時間を要するか。
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