Nitrofuran AMOZ ELISAの食品安全性ミルクの感受性0.03ppb 96Wells/Kitのための急速なテスト キット

ミルクの感受性0.03ppb 96Wells/KitのためのNitrofuran AMOZ ELISAの食品安全性テスト キット

 

1. Nitrofuran AMOZ ELISAの食品安全性テスト キットの主義

 

この検出のキットはサンプルのAMOZの検出のための競争の酵素の免疫学的検定に基づいている。活用された抗原はmicrowellのストリップでプリコートされる。サンプルのAMOZは反AMOZ抗体のためにmicrowellのストリップでプリコートされる活用された抗原と競う。酵素の共役が加えられた後、TMBの基質は汚損のために加えられる。サンプルの光学濃度（OD）の価値はそれのAMOZに否定的に関連する。この価値は標準的なカーブと比較され、AMOZの集中は続いて得られる。

 

2. 技術仕様

 

感受性:0.03ppb

孵化の温度:25℃

孵化の時間:30min~15min

検出限界のティッシュ、卵、蜂蜜:0.1ppb

交さ反応率

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

回復率

ティッシュ80の± 25%

蜂蜜75の± 25%

卵95の± 25%

 

3. Nitrofuran AMOZ ELISAの食品安全性テスト キットの部品

 

1	マイクロよストリップ	取り外し可能な8の12のストリップ それぞれ井戸
2	6×標準ソリューション（1つのmLそれぞれ）	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	酵素の共役	7ml	赤い帽子
4	抗体の使用液	7ml	ブルー キャップ
5	基質A	7ml	白い帽子
6	SubstrateB	7ml	黒い帽子
7	解決を停止しなさい	7ml	黄色い帽子
8	20×は洗浄の緩衝を集中した	40ml	白い帽子
9	2×は解決の再溶解を集中した	50ml	透明な帽子
10	2-Nitrobenzaldehyde （C7H5NO3）	2-Nitrobenzaldehyde （C7H5NO3）	2-Nitrobenzaldehyde （C7H5NO3）

 

4. 必要なが、提供されない材料

 

1) 装置:microplateの読者、プリンター、ホモジェナイザー、窒素のドライヤー、vortexer、遠心分離機、測定の管、バランス（相互0.01g）、定温器、湯せん;

2) Micropipette:単一チャネル20-200µL、100-1000µL、多重チャンネル30-300µl;

3) 試薬:NaOHの酢酸エチル、n-hexane、HCl （約36.5%）、K2HPO4 3H2O。

 

5. サンプル前処理

 

指示しなさい

次のポイントはあらゆる種類のサンプル前処理の前に演説しなければならない:

1) 実験は使い捨て可能な先端しか使用なでき異なった試薬を吸い出した場合先端は取り替えられなければならない;

2) 実験の前に実験結果と干渉する汚染を避けるために、実験装置は必要ならばきれいになり、再きれいにならなければならない。

サンプル前処理の前の解決の準備:

1) 0.1 M K2HPO4:K2HPO4の11.4のgを分解しなさい·500のmLへの脱イオンされた水の3H2O。

2) 1つのM HCl:100つのmLに脱イオンされた水でHCl （約36.5%）の8.6 mLを分解しなさい。

3) 1つのM NaOH:100つのmLに脱イオンされた水でNaOHの4つgを分解しなさい。

4) 希薄な2×はサンプル再溶解のための1:1 （集中される1つのmL解決を+脱イオンされた水1つのmLの再溶解する）に脱イオンされた水が付いている解決を再溶解することを集中し。

 

5.1サンプル準備

）ティッシュ、卵

1) 均質にされたサンプルの1± 0.05gの重量を量りなさい、蒸留水の4mL、0.5mL 1 M HCIを加えれば各管への100µL 2-Nitrobenzaldehyde （C7H5NO3）は2minのために、きちんと揺れる;。

2) 夜（approx16時間）にわたるat37℃を孵化させなさいまたは湯せん（2時間）によってat56℃を孵化させなさい。

3) 各管に5mL 0.1M K2HPO4、0.4mL 1M NaOHおよび6mL酢酸エチルを、30sのための振動加えなさい。

4) 10minのための室温（20-25 ℃）の上の4000r/minの遠心分離機（乳化があるかまたは酢酸エチルの層が3mlのため十分にでなかったり繰り返し孵化させない、10minおよび遠心分離機のための80の℃の湯せんでサンプルを;または速度を増加し、遠心分離機の時を拡張しなさい）。

5) 新しい遠心管への酢酸エチルの層の移動3mLおよび乾燥への50℃で窒素か空気によって蒸発するため。

6) 乾燥した残余を2mL N-hexaneで分解しなさい、薄くされた再溶解の解決の1mL、組合せを30秒、10分の室温（20-25 ℃）の4000 r/minの上のの遠心分離機のためにきちんと加えなさい;層のN-hexane段階を取除きなさい（乳化が、あったり繰り返し遠心分離機にかける、層のN-hexane段階を取除いた後10-20minのための70の℃の湯せんでサンプルを孵化させたり、）。

7) 50に分析のためのより低いののµLを取りなさい。

サンプルの希薄の折目:2

b) 蜂蜜

1) 均質にされたサンプル（蜂蜜）の2± 0.05gの重量を量りなさい、蒸留水の4mL、0.5mL 1 M HCIを加えれば各管への100 µL 2-Nitrobenzaldehyde （C7H5NO3）は2minのために、きちんと揺れる;。

2) 夜（approx16時間）にわたるat37℃を孵化させなさいまたは湯せん（2時間）によってat56℃を孵化させなさい。

3) 各管に5mL 0.1M K2HPO4、0.4mL 1M NaOHおよび6mL酢酸エチルを、30sのための振動加えなさい。

4) 10minのための室温（20-25℃）の上の4000r/minの遠心分離機（乳化があるかまたは酢酸エチルの層が3mlのため十分にでなかったり繰り返し孵化させない、10minおよび遠心分離機のための80の℃の湯せんでサンプルを;または速度を増加し、遠心分離機の時を拡張しなさい）。

5) 新しい遠心管への酢酸エチルの層の移動3mLおよび乾燥への50 ℃で窒素か空気によって蒸発するため。

6) 乾燥した残余を2mL N-hexaneで分解しなさい、薄くされた再溶解の解決の1mL、組合せを30秒、10分の室温（20-25 ℃）の4000r/minの上のの遠心分離機のためにきちんと加えなさい;層のN-hexane段階を取除きなさい（乳化が、あったり繰り返し遠心分離機にかける、層のN-hexane段階を取除いた後10-20minのための70の℃の湯せんでサンプルを孵化させたり、）。

7) 50に分析のためのより低いののµLを取りなさい。

サンプルの希薄の折目:1

 

6. ELISAのプロシージャ

 

6.1指示

1) 使用の前に室温（20-25 ℃）にすべての試薬およびマイクロよストリップを持って来なさい;

2) 使用の直後の2-8 ℃にすべての試薬を戻しなさい;

3) ELISAの分析の再現性は、大部分は、版の洗浄の一貫性によって決まる。版の洗浄の正しい操作はELISAの急所プロシージャである;

4) 一定した温度の孵化のために、すべてのサンプルおよび試薬は露光量を避けなければなり各microplateはカバー膜によって密封されるべきである。

6.2操作のプロシージャ

1) テスト キットを少なくとも30分の室温（20-25 ℃）に持って来なさい、各試薬が使用の前に均等に混合するために揺れなければならないことに注目しなさい版フレームに必須のマイクロよストリップを入れなさい。未使用のmicroplate、凍っていなかった2-8 ℃の店を、封じ直した。

2) 解決の準備:1:19 （1部20の×によって集中される洗浄の緩衝+脱イオンされた水19部の）の脱イオンされた水が付いている20の×によって集中される洗浄の緩衝の希薄な40mL。または必要とされるに応じて準備しなさい。

3) 番号付け:数サンプルおよび標準ソリューションに従うマイクロ井戸;各サンプルおよび標準ソリューションは記録する位置を正副2通りに行われるべきである。

4) 別の重複した井戸にサンプルまたは標準ソリューションの50µLを加えなさい;各井戸に抗体の使用液の50ul酵素の共役そして50µL、組合せを版を手動で揺することによって穏やかに加えなさい。カバー膜を搭載するmicroplate、25 ℃のandincubateをfor30min密封しなさい。

5) 吸収性のペーパーで乾燥するために液体をmicrowell、折り返しから注ぎ、1530年代のためのmicroplateを洗浄するために洗浄の緩衝の250 µL/wellを加え、次に取り、そして吸収性のペーパーと乾燥するためにはためかしなさい4-5回を繰り返しなさい。泡がはためくことの後にあれば（、きれいな先端とのそれらを切った）。

6) 着色:次に各井戸に基質Bの基質Aの50 µLをおよび50 µL加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合し、そして15分の25 ℃で着色のための暗闇で孵化させなさい。

7) 決定:の50µLを停止する各井戸に解決を加えなさい。版を手動で揺することによって穏やかに混合しなさい。あらゆる井戸のODの価値を定めるために450nmでmicroplateの読者の波長を置きなさい。（5分以内の二波長450/630nmでODの価値を読むことを推薦しなさい）。

 

7. 結果の判断

 

結果を判断する2つの方法がある:最初の1つは第2は量的な決定であるが、荒い判断である。サンプルのODの価値にAMOZの集中の否定的な相関関係があることノート。

7.1質的な決定

AMOZの集中範囲（ng/mL）は標準ソリューションのそれとサンプルの平均ODの価値を比較することから得ることができる。、サンプルⅡのそれは1.0Ⅰであり、標準ソリューションのODの価値をサンプルのODの価値が0.3であること仮定することは次のとおりである:0ppbのための2.243は、0.03ppbのための1.816、2.43ppbへ0.09ppbのための1.415、0.27ppbのための0.74、0.81ppbのための0.313、2.43ppbのための0.155、それに応じてサンプルⅠの集中範囲0.81であり、サンプルⅡのそれは0.27ppbへ0.09である。

7.2量的な決定

吸光度の価値の平均は最初の標準ソリューション（0の標準）のODの価値（B0）で分けられ、続いて100%までに、すなわち増加する得られる、サンプルおよび標準ソリューションの平均ODの価値（b）のために

吸光度の価値のパーセント=	B	×100%
	B0

サンプルまたは標準ソリューションのB-the平均OD価値

0 ng/mLの標準ソリューションのB0-the平均OD価値

Y-およびＸ軸として標準ソリューションの吸収のパーセントおよびAMOZの標準ソリューション（ng/mL）のsemilogarithmの価値の標準的なカーブを、それぞれ引きなさい。標準的なカーブに吸収のパーセントを組み込むことによって標準的なカーブからのサンプルの対応する集中を読込みなさい。生じる価値は最終的にサンプルのAMOZの集中を得る対応する希薄の折目によって続いて、増加する。

 

8. 注意

 

1) 25℃か試薬の温度およびサンプルが室温（20-25℃）に戻らないより低ければ室温が、標準的なODの価値は落ちる。

2) 洗浄プロセスの間に、microplateの乾燥は標準的なカーブの非直線性と一緒に伴われ、再現性は理想的ではない;従って、洗浄の直後の次のステップに進みなさい。

3) よく混合しなさい、さもなければ再現性は粗末である。

4) 停止解決は2つのMの硫酸の解決、避ける皮膚の接触をである。

5) 保存性を越えるキットを使用してはいけない。キットからの薄くされるか、またはadulterated試薬の使用は感受性および検出ODの価値の変更で起因できる。キットの異なったバッチの試薬を取り替えてはいけない。

6) ジップ ロック式袋の未使用のmicroplatesを封じ直しなさい。標準ソリューションおよび無色のカプラーはつくために感光型で、直接露出することができない。

7) 解決は低下したことを色が示す着色の解決を放棄しなさい。検出の価値はの標準ソリューション1 （0のppb）のためのより少しにより0.5低下を示す。

8) 最適の反作用の温度は25℃であり、温度が余りに高くまたは余りに低ければ検出の感受性およびODの価値は変わる。

 

9. 貯蔵および満期日

 

貯蔵:凍っていない2-8 ℃の店。

満期日:12か月;生産の日付は箱にある。

注:microplateの真空パックに漏出があれば、使用するためにまだ有効影響を与えない試験結果に、使用するために緩むことであるである。

 

 

Q1:それはいつ出荷されるか。
A1:私達は支払を受け取った後7仕事日以内にあなたのための商品をできるだけ早く出荷する。（伝染病のような外的な要因の場合には、配達は遅れるかもしれない）

 

Q2:それはOEM/ODMを支えるか。
A2:それは支えることができるがカスタマイズされたプロダクトのために便利である特定の量は100,000部分以上である必要がある。

 

Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達は全国的にISO9001およびISO13485を証明した。私達の工程は標準手続きに最適製品品質を保障するために合致する。

 

Q4:売り上げ後のサービスを提供する方法か。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。私達はビデオ、電話、等によって一対一の指導を与えてもいい。

 

Q5:支払方法は何であるか。
A5:私達はT/T.によって支払を受け取る。

 

Q6:出荷する方法か。
A6:私達の多くの協力的なキャリアおよびあなたの条件に従ってまた船から引用を得ることによってあなたのための最もよい出荷方法を選びなさい。